一、實驗概念

免疫印跡（immunoblotting）又稱蛋白質印跡（Western blotting），是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現已成為蛋白分析的一種常規技術。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。結合化學發光檢測，可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。Western Blot方法成熟，大多實驗室均具備Western Blot的實驗能力，但要得到一份背景清晰、條帶明亮、真實客觀的實驗結果需要豐富的實踐經驗，我們技術人員在樣品處理、轉膜和抗體稀釋比例等操作上具有豐富的操作經驗，能夠在短時間內為客戶優化實驗條件，提供客觀真實的實驗結果。

二、實驗流程：

客戶提供樣本及靶蛋白抗體→蛋白樣本抽取及定量→上樣→電泳→轉膜→封閉→抗體孵育顯色→膠片灰度分析數據處理

三、注意事項：

1.組織樣本，離體后盡快凍存。

2.有條件的話，最好先將樣本在液氮中速凍，再轉入-80℃冰箱中保存。

3.對于心肝脾腎等組織可每50~100mg加1ml裂解液，肺100~200mg加1mg裂解液。加入裂解液前，盡量將組織剪成小塊。

4.少量指標，組織需要提供的樣本量要求50mg或更多；細胞樣本需要提供六孔板一個孔的細胞量或更多。

5.客戶可提供目標蛋白一抗（我司可代購）

6.我司可免費提取蛋白、提供二抗、免費內參，如GAPDH，β-actin等